1、保证辅助气和检测器用气畅通,有效检查气体过滤器和进样垫。需要将进样口衬管清洗或更换,如果以前做过较脏样品或活性较高化合物。
2、将螺母和密封垫装在色谱柱上,并将色谱柱两端,小心地切片不要有。
3、色谱柱连接于进样口时色谱柱在进样口中插入深度要根据所用仪器规格不同而定,有些需要距离较长,有些只要短距离即可,插入正确合适才能最大程度保证实验结果正确性。
4、将色谱柱连接在检测器上时应该注意色谱柱与进样口连接要大致相同。
5、一流的色谱柱安装前先确定载气流量,只有通入载气再对色谱柱进行加热才会损坏设备。
6、色谱柱安装与系统捡漏工作完成后就可以对其进行老化,将它升至一定恒温,但不能超过温度上限,达到老化温度后记录并观察基线,初始时应当呈持续上升趋势,到达老化温度后开始下降并持续一段时间,然后到达固定值后就会稳定下来。
7、设置确认适合的载气流速。载气种类首选高纯度氮气或者氢气,越能够延长色谱柱寿命,并在很大程度上降低背景噪音。
对热销的色谱柱进行正确安装后,便可以放心开始混合物分离实验。在使用过程中还要注意色谱柱有没有出现异常现象需要维护,比如可以通过实验后得到的色谱图观察图像是否正常,色谱柱性能是否有出现下降,然后便可以对症下药处理相应问题。
(1)柱头进样型色谱柱(色谱柱进样端留有进样针头长度的距离),安装时直接顶到填充柱最上方,先预压石墨垫,再旋紧螺母(预压好的石墨垫,基本手拧之后扳手加半圈至一圈即可),通载气检测,柱前压调至合适,色谱柱检测器端有均匀载气流出,检测器端顶到最上端,旋紧螺母,检查漏气,确保进样器下端接头,检测器下端接头均不漏气,色谱柱即安装完毕! (2)非柱头进样型色谱柱(进样器端筛网处于色谱柱入口顶端,没有预留进样针头长度的距离),安装时先顶到填充柱最上方,然后下拉进样针头长度距离,先预压石墨垫,再旋紧螺母(预压好的石墨垫,基本手拧之后扳手加半圈至一圈即可),通载气检测,柱前压调至合适,色谱柱检测器端有均匀载气流出,检测器端顶到最上端,旋紧螺母,检查漏气,确保不漏气,色谱柱即安装完毕!
1.使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不含任何缓冲盐和污染物。 2.取用色谱柱时避免磕碰掉落。 3.将色谱柱入口端连接到系统上,柱出口端先不要连接,色谱柱身上有箭头标明正确流向。 4.在0.1mL/min流速条件下用纯乙腈润洗色谱柱,然后在2分钟内将流速升至0.5mL/min。 5.当溶剂均匀的从柱出口端流出,停流速,将色谱柱出口端接到系统检测器上(这样可以避免气泡进入检测系统,并且可快速达到基线平衡)。 6.重启流速,按照步骤4的方法逐渐提高流速,至常规分析时所使用的流速。 7.参考柱效测试报告中的方法,使用该流动相条件平衡色谱柱,通常需要使用5-10倍柱体积的流动相,直至压力与基线稳定。





